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Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述:XL1-Blue MRF`Kan Chemically Competent Cell Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞
XL1-Blue MRF’Kan 菌株來源于 XL1-Blue 株系,是限制酶系統(tǒng)缺失型[? (mcrA)183, ? (mcrCB-hsdSMR -mrr)173],且具有KA那霉素抗性 (Kanr ),可轉(zhuǎn)化具有LU霉素或四環(huán)素抗性的質(zhì)粒。

  • 產(chǎn)品型號(hào):XL1-Blue MRF`Kan
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時(shí)間:2024-03-20
  • 訪  問  量:361

詳細(xì)介紹

品牌Abnbio貨號(hào)ABG009-50
規(guī)格50支100ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥

XL1-Blue MRF`Kan Chemically Competent Cell      保存條件:-80℃

基因型:

?(mcrA)183 ?(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1recA1 gyrA96 relA1 lac [F′proAB lacIqZ?M15 Tn5 (KanR)

簡(jiǎn)要說明:

XL1-Blue MRF’Kan 菌株來源于 XL1-Blue 株系,是限制酶系統(tǒng)缺失型[? (mcrA)183, ? (mcrCB-hsdSMR -mrr)173],且具有KA那霉素抗性 (Kanr ),可轉(zhuǎn)化具有l(wèi)u霉素或四環(huán)素抗性的質(zhì)粒。recA1 和 endA1 的突變 有利于插入 DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提取。hsdR17 突變導(dǎo)致 EcoK 核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,增強(qiáng)了 外源 DNA 的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。lacI q ZΔM15 的存在使 XL1-Blue MRF’Kan 菌株可用于藍(lán)、白斑篩選。 XL1-Blue MRF’Kan 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19 質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。

操作說明:

1.XL1-Blue MRF’Kan 感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,待菌塊融化,加入目的 DNA 并用 手打 EP 管底充分混勻,冰中靜置 25 分鐘。

2.42℃水浴熱激 45 秒,迅速放回冰上并靜置 2 分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

3.向離心管中加入 700 μl 不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT 或LB),混勻后 37℃,200 rpm 復(fù)蘇 60 分鐘。

4.5000 rpm離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的 2YT 或 LB 培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于 37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。

注意事項(xiàng):

1.感受態(tài)細(xì)胞最好在冰中緩慢融化,插入冰中 8 分鐘內(nèi)加入目標(biāo) DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存 放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

2.XL1-Blue MRF’Kan 感受態(tài)細(xì)胞具有KA 那霉素抗性,不可轉(zhuǎn)化具有KA 那霉素抗性的質(zhì)粒。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。




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